1. Úvod

Doplnenienikotínamid mononukleotid (NMN)zvýšiť reguláciuúroveňodnikotínamid adenín dinukleotid (NAD+)bol odhalený ako sľubný zásah proti starnutiu. Stále je to všakVážna výzva na presnékvantifikovať medziprodukty NAD+, NMN obzvlášť. Táto štúdia je zameraná na zavedenie novej metódy, metodiky LC-MS/MS s dvojitým izotopom sprostredkovanej (dimeLC-MS/MS), na presnú kvantifikáciuNMN v biologických vzorkách.

2. Faktory ovplyvňujúce presnú detekciu NMN

NMN je ťažké presne zistiť kvôli jeho zraniteľnosti voči enzymatickémudegradácia, konverzia pri spracovaní vzoriek, jej komplexné správanie v rôznych podmienkach kolóny a extrakcie, ako aj matricový efekt.


Konkrétne má NMN vlastnosti vysokej polarity a nízkej prchavosti, ktorá sa ľahko rozpúšťa vo vode, ale ťažko sa rozpúšťa v organických rozpúšťadlách. Tieto vlastnosti značne obmedzujú aplikáciu mnohých konvenčných metód kvantitatívnej analýzy.

BJologické vzorkynapríkladkrv nesie významné aktivity CD38 a CD73 (ekto-5'-nukleotidáza), pričom obe môžu používať NMN ako substrát.

Správanie NMN v kolóne je veľmi zložité, pravdepodobne kvôli bipartitnej povahe jeho nábojov, takže jemné rozdiely v podmienkach extrakcie a kolóny významne ovplyvňujú spoľahlivú a presnú detekciu NMN.

3. Stratégie zvládaniadisetníkLC-MS/MSznížiť vplyv faktorov vplyvu

Aby sa zabránilo interferencii vyššie uvedených faktorov, pRototypstĺpecNMN-2sa uplatňuje. Tento stĺpecobsahovaťsČastice oxidu kremičitého na báze C18ktoré sú schopnejšie viazať hydrofilné zlúčeniny ako uhlíkové častice, čo zlepšuje schopnosť separácie.

Pkyselina erchlorová (PCA)je zamestnaný, pretože môžeefektívne extrahujte NAD+ a NMN z biologických vzoriek, ako je plazma, s minimálnym straty.

Ak chcete upraviť maticové efekty,apevná suma (1 μM) každého Izotopová zlúčeninajas pridané dobiologickývzorky pred extrakciou PCA.

4. Výhodasdisetníka-MS/MS

Double izotopové NMN štandardy, NMN (M + 14) a NMN (M + 5) v metodike riadenej LC-MS/MS dokážu presne sledovať osud NMN počas spracovania vzoriekktorývýznamne zvyšuje presnosť a spoľahlivosť merania NMN v biologických vzorkách. Okrem toho dimeLC-MS/MS dokáže vyhodnotiť účinnosť extrakcie a absolútne koncentrácie NMN v rôznych typoch biologických vzoriek.

5. Záver

ThJenový model LC-MS/MS-riadená metodológia s dvojitými izotopovými štandardmi NMN môcťAccuraTelya spoľahlivosťLyzmeria sa NMN v biologických vzorkách. Môže sa použiť pre budúce štúdie príjmu NMN.

6. Referencie

Unno, Junya et al. "Absolútna kvantifikácia nikotínamidmononukleotidu v biologických vzorkách dvojitou izotopom sprostredkovanou kvapalinovou chromatografiou-tandemovou hmotnostnou spektrometriou (dimeLC-MS / MS)." starnutie npj zv. 10,1 2. 2. januára 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1

Prečo si vybraťBONTAC?

BONTACje lídrom globálnehoNMNpriemysel. Máme prvú technológiu celoenzýmovej katalýzy v Číne a stali sme sa vedúcim podnikom v oblasti Koenzýmové produkty, ktoré sú široko používané v zdravotníctve, medicíne a kráse,zelené poľnohospodárstvo, biomedicína a iné oblasti.NajmäBONTAC je NMNdodávateľ surovín slávneho tímu Davida Sinclaira na Harvardskej univerzite. Naše služby a produkty sú dôveryhodné. NavyšeBONTACMánezávislýKoenzým Výskumné centrum strojárskej technológie na úrovni provincií v Číne a vlastné továrne, kde je možné zabezpečiť čistotu a stabilitu výrobkov.

Vyhlásenie

ThJeČlánok je Základe odkaz vakademický časopis. Relevantné informácie sú:poskytnúťlen na účely zdieľania a učenia sa a nepredstavuje žiadne účely lekárskeho poradenstva. Ak dôjde k akémukoľvek porušeniu, prosímkontaktautorzavymazaťión. Názory vyjadrené v tomto článku nepredstavujú pozíciuBONTAC.