Vedecká metóda na kvantifikáciu NMN v biologických vzorkách
1. Úvod
DopĺňanieMononukleotid nikotínamid (NMN)na zvýšenie regulácieÚroveň zNikotínamid adenín dinukleotid (NAD+)bol predstavený ako sľubná intervencia proti starnutiu. Napriek tomu je to stále vážna výzva na presnosťkvantifikujte NAD+ medziprodukty, NMN Najmä. Táto štúdia má za cieľ zaviesť novú metódu, dvojito izotopovo sprostredkovanú LC-MS/MS metodológiu (dimeLC-MS/MS), na presnú kvantifikáciuNMN v biologických vzorkách.2. Faktory ovplyvňujúce presnú detekciu NMN
NMN je ťažké presne detegovať kvôli jeho zraniteľnosti voči enzymatickým látkamdegradácia, konverzia pri spracovaní vzorky, jej zložité správanie v rôznych kolónových a extrakčních podmienkach, ako aj matrixový efekt.
Konkrétne, NMN má vlastnosti vysokej polarity a nízkej prchavosti, čo sa ľahko rozpúšťa vo vode, ale ťažko sa rozpúšťa v organických rozpúšťadlách. Tieto vlastnosti výrazne obmedzujú použitie mnohých konvenčných metód kvantitatívnej analýzy.
BJologické vzorkynapríklad krv nesie významné aktivity CD38 a CD73 (ekto-5’-nukleotidáza), ktoré by mohli použiť NMN ako substrát.
Správanie NMN v kolóne je veľmi zložité, pravdepodobne kvôli bipartitnej povahe jeho nábojov, takže jemné rozdiely v extrakcii a podmienkach kolóny výrazne ovplyvňujú spoľahlivú a presnú detekciu NMN.
3. Zvládacie stratégiedimeLC-MS/MS na zníženie dopadu impakt faktorov
Aby sa predišlo interferencii vyššie uvedených faktorov, pRototypStĺpecNMN-2 sa uplatňuje. Tento stĺpčekobsahovaťs Kremičité častice s vysokou čistotou na báze C18 ktoré sú schopnejšie viazať hydrofilné zlúčeniny ako uhlíkové častice, čím sa zlepšuje schopnosť separácie.PKyselina erchlorová (PCA) sa používa, pretože môže efektívne extrahovať NAD+ a NMN z biologických vzoriek, ako je plazma, s minimálnym straty.
Na úpravu matrixových efektov,a Pevné množstvo (1 μM) každého Izotopová zlúčeninais pridané kbiologické vzorky pred extrakciou PCA.
4. Výhodas dimeLC-MS/MS
Double izotopové NMN štandardy, NMN (M + 14) a NMN (M + 5) v metodológii riadenej LC-MS/MS môžu presne sledovať osud NMN počas spracovania vzorky, ktorývýrazne zvyšuje presnosť a spoľahlivosť merania NMN v biologických vzorkách. Okrem toho dimeLC-MS/MS dokáže vyhodnotiť efektívnosť extrakcie a absolútne koncentrácie NMN v rôznych typoch biologických vzoriek.
5. Záver
Thje nové LC-MS/MS-riadená metodológia s dvojitými izotopovými NMN štandardmi môže accurately a Reliably merať NMN v biologických vzorkách. Môže sa použiť na budúce štúdie príjmu NMN.6. Referencia
Unno, Junya et al. "Absolútna kvantifikácia mononukleotidu nikotínamidu v biologických vzorkách pomocou dvojitej izotopovo sprostredkovanej kvapalinovej chromatografie a tandemovej hmotnostnej spektrometrie (dimeLC-MS/MS)." NPJ starnutie zv. 10,1 2. 2. januára 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Prečo si vybraťBONTAC?
BONTACje lídrom globálnehoNMNpriemysel. Máme prvú technológiu katalýzy celých enzýmov v Číne a stali sme sa vedúcim podnikom v tomto odvetví Koenzýmové produkty, ktoré sa široko používajú v zdravotníctve, medicíne a kozmetike, zelené poľnohospodárstvo, biomedicína a ďalšie oblasti. Významne,BONTAC je NMNDodávateľ surovín pre slávny tím Davida Sinclaira na Harvardskej univerzite. Naše služby a produkty sú dôveryhodné. Navyše,BONTACmánezávislýKoenzým Centrum výskumu inžinierskej technológie na provinčnej úrovni v Číne a vlastné továrne, kde je možné zabezpečiť čistotu a stabilitu produktov.
